產(chǎn)品名稱:10-310 kDa彩色預(yù)染蛋白Marker
規(guī)格:
目錄號(hào) |
產(chǎn)品名稱 |
規(guī)格 |
X13178-250ul |
10-310 kDa彩色預(yù)染蛋白Marker |
250ul |
儲(chǔ)存運(yùn)輸:
運(yùn)輸條件 |
冰袋運(yùn)輸 |
儲(chǔ)存條件 |
-20?C 恒溫長期保存,4?C 保存 6 個(gè)月,建議分裝保存,避免反復(fù)凍融 |
產(chǎn)品簡(jiǎn)介
本產(chǎn)品由跨度從 10~310 kDa 的 10 種純化的天然蛋白混合而成,各條帶濃度約為 0.2~0.4 mg/ml。其中 75 kDa 和 310kDa 條帶為紅色
預(yù)染條帶,25kDa 為綠色預(yù)染條帶,方便判斷各個(gè)條帶的準(zhǔn)確位置。本產(chǎn)品適合作為 SDS-PAGE 電泳時(shí),變性蛋白樣品的分子量參照,
并可實(shí)時(shí)觀察蛋白樣品的電泳分離狀況,也可用于檢測(cè) Western blot 的轉(zhuǎn)膜效率。由于共價(jià)結(jié)合的染料會(huì)影響蛋白質(zhì)分子的電泳遷移率,本產(chǎn)品適于粗略地估計(jì)目的蛋白樣品的分子量。
使用方法
1. 將本產(chǎn)品于室溫融化后,輕柔混勻,使沉淀充分溶解;
2. 加入 3~5 μl 到 SDS-聚丙烯酰胺膠的上樣孔中,與待測(cè)樣品一起電泳和轉(zhuǎn)膜;
3. 電泳結(jié)束后,通過考馬斯亮藍(lán)染液染色觀察條帶。
注意事項(xiàng)
1. 使用時(shí)應(yīng)該將從冰箱中取出的產(chǎn)品恢復(fù)至室溫后使用,否則可能由于低溫下蛋白變性不徹底導(dǎo)致電泳條帶出現(xiàn)不同程度的彌散;
2. 使用前先將產(chǎn)品恢復(fù)至室溫后混勻,使沉淀充分溶解,否則可能導(dǎo)致電泳條帶出現(xiàn)不同程度的彌散或拖帶;
3. 本產(chǎn)品含有 SDS,蛋白已變性,不宜作為天然蛋白分子電泳時(shí)的分子量參照標(biāo)準(zhǔn)。
圖列展示
附錄:轉(zhuǎn)膜和洗膜
A、轉(zhuǎn)膜條件(冰上進(jìn)行):
a. Transfer with buffer containing 20% methanol to fix proteins on membrane.
b. Wash membrane with PBS or TBS containing less than 0.1% Tween-20 at 4°C.
B、洗膜條件(4 度進(jìn)行):
Membrane: Nitrocellulose membranes / PVDF
Wash Buffer:1X Tris buffered saline, 0.1% Tween-20 (TBST)(吐溫 20 不能超過 0.1%)
C、Stripping Buffer: 15g Glycine, 1g SDS, 10 ml Tween20, pH2.2–Adjust volume to 1L
如果需要用到含有 DTT /b-ME 的 Stripping buffer,膜需要先以 1X Tris buffered saline(TBS) 洗三次,把 Tween-20 去
干凈后,再進(jìn)行 Stripping。
1X Tris buffered saline: 6.05 g Tris and 8.76 g NaCl in 800 mL of H2O.
Adjust pH to 7.5 with 1 M HCl and make volume up to 1 L with H2O
本產(chǎn)品僅供科研使用,不可用于臨床診斷應(yīng)用或其他用途。