MarkerGene^TM Glucuronidase (GUS) Reporter GeneActivity Detection Kit

背景描述：

       報(bào)告基因普遍用做“標(biāo)志物 Markers”對(duì)基因調(diào)控和定位分析，以及突變基因分析。通過(guò)免疫實(shí)驗(yàn)，生化活性或組織化學(xué)分析來(lái)對(duì)組織或細(xì)胞的報(bào)告基因表達(dá)進(jìn)行檢測(cè)。

       大腸桿菌來(lái)源的β-葡萄糖苷酶（β-glucuronidase，GUS）普遍認(rèn)為是轉(zhuǎn)基因植物研究中非常理想的報(bào)告基因（marker gene）。GUS報(bào)告基因系統(tǒng)具有許多優(yōu)勢(shì)，包括穩(wěn)定表達(dá)大腸桿菌GUS，不會(huì)干擾正常植物代謝和高等植物內(nèi)幾乎無(wú)內(nèi)源性GUS活性。

數(shù)種葡萄糖醛酸底物可用來(lái)檢測(cè)GUS表達(dá)，這些底物都包含糖基D-葡萄糖醛酸苷（D-glucopyranosiduronic acid）通過(guò)糖苷鍵連接到生色底物、熒光底物或其他檢測(cè)分子的—OH。體外用于GUS活性檢測(cè)的最廣泛使用的熒光底物為MUG（4-Methylumbelliferyl beta-D-glucuronide，4-甲基傘型酮-beta-D-葡糖苷酸，CAS：6160-80-1或881005-91-0）。一旦被水解，生成熒光素4-MU（4-甲基傘型酮）和β-D-葡萄糖醛酸。

檢測(cè)原理：

本MarkerGene^TM GUS報(bào)告基因活性檢測(cè)試劑盒（MarkerGene^TM Glucuronidase(GUS) Reporter Gene Activity Detection Kit）以MUG為熒光顯色底物。當(dāng)植物或其他細(xì)胞用GUS萃取液（含磷酸-EDTA，pH 7.0和去污劑）萃取后，所得到的萃取液（含GUS）能水解4-MUG生成4-MU（4-甲基傘型酮，pKa 8.2）和β-D-葡萄糖醛酸。加入碳酸鈉緩沖液終止該反應(yīng)（因4-MU在pH值高于pKa的情況下發(fā)射最大熒光信號(hào)）。4-MU的最大激發(fā)波長(zhǎng)為365nm，最大發(fā)射波長(zhǎng)為455nm。

試劑盒組分：

訂購(gòu)信息：

使用文獻(xiàn)（MarkerGene? β-Glucuronidase(GUS) Reporter Gene Activity Detection Kit）：

Hesari N, Alum A, Elzein M, Abbaszadegan M. (2016) "Abiosensor platform for rapid detection of E. coli in drinking water."Enzyme and Microbiol Tech 83: 22-28.http://dx.doi.org/10.1016/j.enzmictec.2015.11.007

Almeyda CV, Raikhy G, Pappu HR. (2015) "Characterization andcomparative analysis of promoters from three plant pararetroviruses associatedwith Dahlia (Dahlia variabilis)." Virus Genes. 51(1):96-104

Li L, Song Y, Wang K, Dong P, Zhang X, Li F, Li Z, Ren M. (2015)"TOR-inhibitor insensitive-1 (TRIN1) regulates cotyledons greening inArabidopsis." Front Plant Sci. 6:861.

Shepherd DN, Dugdale B, Martin DP, Varsani A, Lakay FM,Bezuidenhout ME, Monjane AL, Thomson JA, Dale J, Rybicki EP (2014)"Inducible Resistance to Maize Streak Virus." Lin B, ed. PLoS ONE9(8):e105932. doi:10.1371/journal.pone.0105932.

Chen Y, Yordanov YS, Ma C, Strauss S, Busov VB. (2013) "DR5as a reporter system to study auxin response in Populus." Plant Cell Rep.32(3):453-63.

Behringer C, Bartsch K, Schaller A. (2011) "Safeners recruitmultiple signalling pathways for the orchestrated induction of the cellularxenobiotic detoxification machinery in Arabidopsis." Plant Cell Environ. 34(11):1970-85.

Horváth BM, Magyar Z, Zhang Y, Hamburger AW, Bakó L, Visser RG,Bachem CW, B?gre L.(2006) "EBP1 regulates organ size through cell growthand proliferation in plants." EMBO J.25(20):4909-20.